Технология измерения СОЭ - ALIFAX

Определение СОЭ с помощью Alifax-2


Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ)
широко используется в мониторинге течения воспалительных процессов. СОЭ ускоряется при опухолях, инфекционно-воспалительных заболеваниях, аутоиммунных процессах. Обычно показатель СОЭ прямо коррелирует с активностью воспалительного процесса и в ряде случаев используется в качестве одного из критериев для оценки активности заболевания, в частности при ревматоидном артрите и болезни Крона.

Изменение и измерение СОЭ


Феномен ускорения СОЭ связан с изменениями белкового состава крови и свойств мембран эритроцитов. При наличии воспалительного процесса в крови повышается уровень острофазных белков, которые адсорбируются на поверхности отрицательно заряженных эритроцитов, снижая их заряд. Это приводит к агглютинации эритроцитов и формированию так называемых «монетных столбиков», которые, находясь в капиллярной пробирке, оседают быстрее, чем отдельные эритроциты. Значение СОЭ достигает своего пика медленно, а ее нормализация может занять несколько дней, даже если клинически состояние пациента улучшилось, или уровень воспаления снизился.В действительности, измерение СОЭ – это измерение стабильности суспензии эритроцитов в плазме крови в специфических условиях теста. График зависимости оседания эритроцитов в плазме от времени представляет собой типичную сигмовидную кривую с тремя отдельными фазами. Начальная фаза кривой – лаг-фаза, во время которой формируются «монетные столбики». Размер образующихся на этой стадии агрегатов является определяющим для всего процесса оседания. В ходе второй фазы оседание эритроцитов ускоряется. Во время конечной фазы агрегаты скапливаются на дне пробирки. Две основных детерминанты СОЭ – это степень агрегации эритроцитов и гематокрит (общий объем эритроцитов). Время оседания клеток на каждой стадии очень сильно варьирует от пациента к пациенту, поэтому выбор временного интервала измерения становится произвольным.

Методики определения СОЭ


В 1998 г. компанией Alifax (Италия) были разработаны автоматические анализаторы СОЭ — линейки Test 1, в основе принципа работы которых лежит измерение кинетики агрегации эритроцитов оптическим методом. Первоначально анализаторы были предназначены для измерения СОЭ венозной крови, но в 2008 г. компания представила новые анализаторы Roller PN, использующие в работе тот же принцип и позволяющие выполнять исследования не только венозной, но и капиллярной крови.
Roller 20 PN — автоматический анализатор закрытого типа для определения СОЭ (см. рис. справа). В основе запатентованной технологии измерения лежит оценка агрегационной способности эритроцитов путем капиллярной микрофотометрии с использованием кинетического метода. В отличие от других автоматических систем в данном методе происходит измерение агрегации эритроцитов в течение первых 20 с формирования монетных столбиков. Пробирки с кровью помещаются в ротор вместимостью 20 проб, где происходит их автоматическое перемешивание вращением в течение 4,5 мин.
Далее с помощью автоматической иглы анализатор отбирает аликвоту крови в микрокапилляр, где происходит ее ускорение и остановка (метод «остановленной струи»), что в свою очередь инициирует процесс агрегации эритроцитов. С помощью фотометра на рабочей длине волны 650 нм происходит измерение величины пропускания в капилляре с кровью. Для каждого образца строится кривая седиментации. Математический алгоритм, заложенный в анализаторе, преобразует исходные данные, полученные из оптической оценки пропускания, в результаты СОЭ. Получение первого резуль тата происходит через 5 мин, а последующих — через каждые 25–35 сек. анализа в зависимости от типа крови.

Долгое время процедура определения СОЭ, для которой обычно используются ручные или полуавтоматические методы, рассматривалась как простая процедура, не требующая проведения контроля качества (QC). В соответствии с таким взглядом определение СОЭ считается полуколичественным тестом, а не серьезным гематологическим исследованием с каким-либо клиническим значением. Новое тысячелетие требует от определения СОЭ автоматизации с обязательным усовершенствованием аналитической техники, лабораторного производственного процесса, стандартизации и повышения безопасности. За последние несколько лет на лабораторном рынке появился ряд коммерческих контрольных материалов, однако большинство из них производится из стабилизированной цельной крови и не подходит для методик и анализаторов, измеряющих кинетические параметры реакции седиментации, таких как, например, ТЕСТ1. Недавно для повышения достоверности получаемых на анализаторе результатов и проведения статистического контроля качества были разработаны новые латексные контрольные материалы.
Последняя модель анализатора TECT1 – ТЕСТ1 THL – оснащена новой версией программного обеспечения, которая позволяет использовать новые латексные контроли.

Контрольные материалы: турбодиметрические стандарты


Новые контрольные материалы для анализаторов ТЕСТ1 – это готовые к использованию турбодиметрические стандарты, представляющие собой водные растворы синтетических латексных частиц трех разных концентраций (по 3 мл каждый). Каждый уровень характеризуется определенными значениями мутности, на основании которых анализатор определяет оптические параметры, коррелирующие со значениями СОЭ. Для выполнения данного контрольного теста используется та же процедура, что и для анализа проб пациентов.

Технологические преимущества автоматизированного измерения СОЭ (быстрота выполнения процедуры, уменьшение числа ручных манипуляций, стандартизация условий исследования, возможность проведения контроля качества) делают его использование в лабораторной практике более предпочтительным, по сравнению с технологиями, основанными на методе Вестергрена.