Иммуногистохимическое исследование желудка

Анализ слизистой оболочки желудка на Helicobacter pylori

Иммуногистохимическое исследование слизистой оболочки желудка на Helicobacter pylori – метод лабораторной диагностики, направленный на обнаружение бактерий, вызывающих воспалительные процессы в желудке и двенадцатиперстной кишке. Важно провести именно эту методику, так как она определяет наличие или отсутствие хеликобактер пилори, а также ее точную концентрацию в образце. Врач сможет поставить точный диагноз, оценить степень распространения патологического процесса. Если анализ назначен своевременно, лечение даст хороший эффект, предотвратит осложнения.

При распространении Helicobacter pylori по желудку и двенадцатиперстной кишке возникают неспецифические симптомы желудочно-кишечной патологии. К ним относят тяжесть в животе после употребления пищи, боль, изжогу, изменение вкусовых привычек, периодическую рвоту. Подобные признаки могут развиваться при разнообразных патологиях ЖКТ, поэтому важно провести дифференциальную диагностику. Если врач подозревает заражение хеликобактер пилори, рекомендуется иммуногистохимическое исследование слизистой оболочки желудка. Анализ необходим для достижения следующих целей:

• дифференциальная диагностика между хеликобактериозом и другими желудочно-кишечными заболеваниями, вызывающими схожие симптомы (дуоденит, гастрит, рак желудка), когда другие тесты не дают точных данных;
• оценка степени распространения бактерий при подтвержденном диагнозе;
• оценка антибактериальной терапии, после которой объем бактерий должен значительно снизиться, что подтверждает качественный результат и положительную динамику лечения;
• определение прогноза заболевания, который напрямую коррелирует со степенью распространения бактерий;
• дополнительное определение чувствительности выявленных бактерий к препаратам при запросе от врача;
• оценка стадии развития патологии, которая может находиться в острой и хронической стадии, а также переходить в ремиссию (болезнь хроническая, поэтому полное выздоровление не наблюдается);
• отслеживание пациентов в стадии ремиссии, для них тест назначают каждые 3-6 месяцев, чтобы своевременно определять обострение, предотвращать формирование язвенного процесса.

Исследование рекомендует врач-гастроэнтеролог, который предварительно провел общий осмотр. Помимо иммуногистохимического теста могут потребоваться другие анализы, чтобы составить полную картину о хеликобактериозе, риске образования язвы.

Общее описание анализа

Иммуногистохимическое исследование – это точный и достоверный анализ, проводимый для оценки наличия или отсутствия раковых клеток, а также некоторых видов бактерий, в том числе хеликобактер пилори. Тест основан на применении реагента, который содержит специфические антитела, направленные только против хеликобактер пилори. Они включают на поверхности метку флюорохрома, поэтому при образовании комплексов происходит окрашивание. По нему можно рассмотреть бактерии под микроскопом, выявляя их наличие или отсутствие, а также степень распространения в образце.

Для методики характерны следующие особенности:

• результат анализа можно получить через 3-5 дней, однако врач может запросить срочный анализ, тогда его можно ожидать уже в течение суток;
• на результаты исследования могут повлиять многие факторы, поэтому без проведения предварительной подготовки его осуществлять нельзя;
• методика полуколичественная, то есть с ее помощью можно выявить наличие и степень распространения бактерий, но точную ее концентрацию определить невозможно;
• при сборе биоматериала соблюдают условия стерильности, попадание посторонних микроорганизмов или веществ влечет за собой получение ложных результатов, что потребует пересдачи теста;
• если в образце найден сгусток крови, требуется пересдать анализ, дальнейшее проведение теста не даст результат.

Благодаря методу иммуногистохимического исследования обеспечивается наиболее специфическое выявление бактерии хеликобактер пилори. Врач-цитолог сможет полностью просмотреть биоматериал, чтобы судить о наличии или отсутствии патологии микроорганизма. Но подтвердить диагноз хеликобактериоза, а также язвенной болезни может только гастроэнтеролог.

Диагностика Helicobacter pylori

Грамотрицательная бактерия, имеющая спиралевидное тело длиной всего лишь 3 мкм, которая попадая в организм человека из естественных водоемов, обитает в нижнем отделе желудка, носит название Helicobacter pylori. Она способна спровоцировать развитие серьезных поражений слизистой кишечника и желудка. Диагностика хеликобактериоза остается очень актуальным вопросом для назначения эффективного лечения таких заболеваний.

Существует несколько методов для диагностики Helicobacter pylori в слизистой желудка: гистологический, культуральный и уреазный. Также используется ПЦР диагностика инфекции Helicobacter pylori. Самым надежным является гистологический метод - точность почти 95%. Одна из разновидностей гистологического метода - иммуногистохимический анализ. Это метод очень хорош даже при малом осеменении слизистой желудка бактерией. Его суть заключается в следующем: биопсионный материал обрабатывают специальными моно - колониальными к хеликобактерии антителами.

Исследование широко используется в диагностике:

• язвенных повреждений слизистой желудка и кишечника;
• гастритов;
• дуоденита;
• рака желудка;
• лимфомы желудка.

Когда назначается исследование

Иммуногистохимическое исследование дает представление о возбудителе инфекции. Чаще всего, инфицирование случается бытовым путем - через слюну и слизь зараженного человека. Попадая в новый организм, бактерии "зарываются" в слизистую желудка, нарушают ее структуру, что приводит к неполноценному функционированию.

С помощью исследования выявляют наличие или отсутствие хеликобактер пилори, а также степень ее распространения. Если у пациента обнаружен микроорганизм, это не значит, что формируется патология, так как он в норме может встречаться в микрофлоре. Поэтому с помощью иммуногистохимического теста можно определить хеликобактериоз. Тест назначают при наличии следующих симптомов:

• боль в животе неясной этиологии, которая периодически повторяется и усиливается;
• дискомфорт в животе, проявляющийся сразу после употребления пищи;
• тяжесть в желудке;
• часто развивающаяся изжога, которая проявляется даже при отсутствии употребления специфических продуктов.

Анализ назначают при подозрении хеликобактериоза, который впоследствии может вызвать язву желудка и двенадцатиперстной кишки, или уже спровоцировал развитие этого процесса.

Как подготовиться к иммуногистохимическому исследованию

Биоматериал для исследования получают из патологически аномального очага, взятие проводится лечащим врачом пациента. Взятый объект помещается в контейнер с 10% формалином и доставляется в лабораторию; там из образца готовят препараты, которые окрашивают и микро - скопируют.

Процедуру проводят утром, строго натощак, допускается питье воды в небольших количествах.

Для того, чтобы анализ дал точный результат, пациенты должны знать правила поведения до этой процедуры:

• обследование проводится до начала приема антибактериальных препаратов;
• за три дня до анализа нужно прекратить прием медикаментов, разжижающих кровь; отказаться от острой пищи, спиртных напитков, кофе;
• ужинать накануне нужно не позднее 20 часов;
• перед процедурой можно пополоскать горло раствором антисептика - это снизит чувствительность во время введения зонда.

На результаты анализа могут повлиять многие факторы, поэтому перед ним требуется подготовиться по следующим этапам:

• отсутствие употребления антибактериальных средств за 2 недели;
• отсутствие употребления любых новых лекарственных средств, о которых не был предупрежден лечащий врач за 2 недели;
• отсутствие или завершение употребления антикоагулянтов за 3 дня;
• последний прием пищи за 8-12 часов до сдачи биологического материала;
• отсутствие употребления жирной, острой, жареной, копченой еды за сутки;
• отсутствие употребления алкоголя за 1 день;
• отсутствие курения непосредственно в день сдачи анализа.

Перед забором биоматериала рекомендовано прополоскать рот антисептиком. Также врач обрабатывает ткани зева анестетиком. Два этих компонента уменьшают болевой синдром, поэтому введение зонда вызовет уменьшение чувствительности. Процедура забора биоматериала пройдет легче для пациента, так как исчезнет дискомфорт и рвотный рефлекс.

Методика проведения анализа

Для проведения иммуногистохимического метода используют последовательные действия, которые выполняет врач-лаборант.

1. Забор биоматериала. Для этого используют инвазивную процедуру при помощи зонда, который вводят перорально. Отбирают кусочек ткани на поверхности слизистой оболочки желудка. Ее размещают в стерильный контейнер, который сразу же отправляют в лабораторию.
2. Соединение биоматериала с реагентом. Добавляют специфический реагент, в котором содержатся антигены, направленные именно против Helicobacter pylori. Ожидают, пока сформируются иммунные комплексы, на поверхности которых будет содержаться флюоресцентная метка. С ее помощью бактерию можно рассмотреть под микроскопом. Для ускорения этого процесса образцы отправляют в инкубатор. Так комплексы сформируются сразу.
3. Микроскопия. Образец устанавливают под микроскопом, просматривая все содержимое. Выявляют бактерию, которая будет видна при помощи флюоресцентной метки. Также оценивают степень ее распространения, которую отмечают в крестах, где минимальные данные помечают одним крестом, а максимальные – тремя. При отсутствии микроорганизма ставят прочерк, это означает, что патология отсутствует или она вызвана другой причиной.

Данные записывают в бланк лабораторного исследования, который отдают врачу или пациенту. Оценивать их должен только специалист, то есть гастроэнтеролог или инфекционист.

Что означают результаты исследования

В ответе анализа указывается качественный результат "обнаружена" хеликобактерия или "не обнаружена". В норме - Helicobacter pylori не выявляется.

Расшифровкой должен заниматься только лечащий врач, так как он оценивает не только результаты исследования, но и симптомы, историю болезни, сведения от других лабораторно-инструментальных тестов. Данные интерпретируют по следующей схеме:

• «+» – присутствие микроорганизма, но в малых концентрациях;
• «++» – средний объем бактерии, что приводит к воспалительным процессам;
• «+++» – большой объем бактерий, вызывающий развитие язвы.

Если бактерии не обнаружены, в результатах ставят прочерк. В этом случае при наличии негативных симптомов назначают вспомогательные лабораторно-инструментальные тесты, чтобы выявить их причину.

На результаты анализа могут повлиять нарушения, допущенные при заборе, фиксировании и доставке биоматериала в лабораторию.

Очень важно:

• тщательно закрывать емкость с образцом - не допустить высыхания фиксатора и ткани биоматериала;
• материал в виде сгустка крови, слизи не может расцениваться как полноценный образец для исследования;
• запрещено делить полученный образец и отправлять его в разные лаборатории, это приводит к разным результатам исследования.