Иммуногистохимическая диагностика рака молочной железы

Анализ рецепторного статуса рака молочной железы

Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса рака молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu) – лабораторный метод, позволяющий оценить разновидность и причину опухоли вследствие влияния на различные рецепторы, определить ее гормональный статус. Возможна диагностика как первичных, так и рецидивирующих новообразований. Поэтому анализ назначают при подозрении патологии, а также для отслеживания динамики ее развития. Его рекомендует онколог, маммолог, гинеколог.

При назначении исследования определяют влияние на различные типы рецепторов, из-за которых развивается опухоль. Каждый из них обладает отличающимся значением.

1. ER, PR. Это рецепторы, на которые воздействует эстроген и прогестерон. То есть они гормонально-зависимые, их деятельность стимулируется под влиянием перечисленных веществ. Если злокачественные новообразования образуются вследствие дефектов этих рецепторов, для пациентки подбирают гормональные препараты, блокирующие их функцию.
2. Her2 neu. Это белок, который при обильной выработке приводит к развитию опухоли, так как является эпидермальным фактором роста. Его оценка не может составить прогноз, но помогает подобрать правильную терапию. В нее входят специфические препараты на основе моноклональных антител.
3. Ki67. Это показатель, указывающий на возможность неограниченного деления атипичных клеток в опухоли. При повышенном значении говорят об агрессивности опухоли, что требует радикальных методов терапии. Если новообразование находится в состоянии покоя, данный белок не выделяется.

Так как в исследовании определяют все 3 показателя одновременно, оно предоставляет следующую информацию:

• наличие или отсутствие злокачественного новообразования, локализующегося в молочных железах;
• возможность гормональной зависимости опухоли, от чего определяют дальнейшую тактику лечения, так как в этом случае назначают препараты, блокирующие гормонозависимые рецепторы;
• составление прогноза развития патологии, чем больше выделяется белка, тем быстрее опухоль увеличивается в размерах, хуже поддается методам лечения;
• оценка стадии развития злокачественного новообразования – острая, хроническая, период ремиссии;
• отслеживание пациентов в период ремиссии, если возникает обострение, незамедлительно приступают к терапии до развития симптомов или осложнений (в этом случае тест проводят каждые 6 месяцев);
• оценка назначаемых методов терапии в процессе их применения, а также после полного завершения всех приемов, чтобы подтвердить прогрессирование или переход в ремиссию.

Для иммуногистохимического теста требуется проведение инвазивной процедуры в виде биопсии. Извлекают кусочек опухоли, из которого изготавливают препарат, подлежащий микроскопии. Поэтому анализ невозможно проводить часто. Однако онкологи советуют выполнять его не реже 1 раза в 3 месяца во время лечения. Если у пациентки наблюдается повторное разрастание ткани, тест повторяют уже при ремиссии.

Общее описание анализа

Иммуногистохимическое исследование – это лабораторный метод диагностики, который в первую очередь используют для обнаружения раковых клеток. Он основан на применении реактива, включающего антитела, меченые флюорохромом. Этот реагент добавляют к взвеси клеток, изъятых из опухоли. Как только происходит соединение, комплексы приобретают свечение. Его определяют под микроскопом, подсчитывая примерное количество атипичных клеток, а также степень их распространения.

Для исследования характерны следующие особенности:

• на выполнение разных этапов анализа требуется время, поэтому результаты ожидают через 3-5 дней, в случае потребности получения экстренных данных результата ожидают в течение суток;
• тест полуколичественный, определяет степень распространения клеток, но не их точный объем;
• перед сдачей биоматериала проходят подготовку, чтобы результаты получились точными, а пациенту не потребовалось пересдавать анализ;
• биоматериал – биоптат из молочной железы в той области, где предполагается образование опухоли (берут ткани из нескольких участков, чтобы повысить шансы на получение точных сведений);
• если в тканях молочной железы в ходе исследования изменений не выявили, но симптомы указывают на злокачественное новообразование, можно провести иммуногистохимический анализ из тканей лимфоузлов или иных органов;
• недопустимо проведение анализа в случае, если в биоматериале обнаружен сгусток крови;
• во многих лабораториях используют разнообразную шкалу оценки полученных данных, поэтому в бланке исследования обязательно указывают, какая из них используется.

В исследовании искомые белки могут отсутствовать или быть обнаружены. Все эти данные заносят в бланк при завершении теста. Оценивают весь полученный биоматериал, чтобы не пропустить даже малейшее количество патологических элементов.

Когда назначают анализ

Иммуногистохимическая диагностика рецепторного статуса рака молочной железы (PR, ER, ki67, Her2 neu) рекомендовано проводить при наличии показаний:

• опухоль в молочной железе, которая была выявлена в ходе пальпации и маммограммы;
• оценка причины развития новообразования, в данном случае определяют гормонально зависимый статус;
• потребность в подборе адекватных методов терапии, которые дадут эффект в короткие сроки, предотвратив развитие объемной опухоли, а также метастазов;
• оценка прогноза течения болезни с определением возможности выздоровления;
• оценка потребности хирургического вмешательства, лучевой или химиотерапии, приема гормональных средств.

Если врач заподозрил обострение после ремиссии, но в этот момент опухоль не образуется, рекомендовано брать образец тканей из лимфатических узлов.

Подготовка к анализу

Перед забором биоматериала требуется подготовка в течение 7-10 дней. В этот период придерживаются следующих рекомендаций:

• отсутствие употребления новых лекарственных средств, о которых заранее не был предупрежден лечащий врач за 7-10 дней;
• отсутствие употребления гормональных препаратов за 2 недели;
• отсутствие стресса, нервного или физического перенапряжения, нагрузок за 3 суток;
• запрет употребления алкогольных напитков за 1 сутки;
• отсутствие использования методов лечения, если диагноз устанавливается впервые.

Других рекомендаций нет, так как остальные факторы не влияют на функциональность рецепторов и белков разного типа.

Методика проведения анализа

Для выполнения анализа предварительно требуется осуществить забор биоматериала. Для этого используют тонкую иглу, которую вводят в молочную железу, забирают частичку ткани из опухоли. Сохраняя полную стерильность, образец устанавливают в контейнер, отправляют в лабораторию. Далее тест проводят по этапам.

1. Соединение образца ткани и реагента. Добавляют реагент, в котором содержатся антитела с метками. Чтобы иммунные комплексы сформировались быстрее, соединенные образцы отправляют в инкубатор. Под действием повышенных температур этот этап проходит быстро.
2. Микроскопия. Полученный образец цитолог просматривает под микроскопом, определяя мембранное окрашивание. Оценивают содержание определенных белков на поверхности рецепторов. Выявляют степень распространения этих элементов, чтобы судить о прогрессировании опухоли.

В ходе проведения теста оценивают индекс пролиферативной активности, чтобы оценить степень разрастания опухоли, активность патологических рецепторов и эффекты от лечения.

Расшифровка анализа

В ходе оценки полученного биоматериала учитывают следующие факторы:

• степень распространения окрашивания по пятибалльной шкале;
• интенсивность окрашивания по трехбалльной шкале;
• степень позитивности опухоли по рецепторному статусу;
• эффективность гормональной терапии при ее начале;
• рецепторный статус в зависимости от степени окрашивания ядер клеток;
• мембранное окрашивание рецептора Her2/neu по трехбалльной шкале, где 0 или 1 – это негативно, 2 – пограничный результат, 3 – положительно;
• пролиферативная активность опухоли в зависимости от уровня Ki67, где ее отсутствие составляет не более 15%, средний результат до 30%, высокий – 30% и более.

Данные подлежат расшифровке только онкологом, который дополнительно учтет симптоматику, историю болезни и данные других лабораторно-инструментальных тестов.